牛肉膏蛋白质的配方？牛骨膏汤的作用

大家好，关于牛肉膏蛋白质的配方很多朋友都还不太明白，今天小编就来为大家分享关于牛骨膏汤的作用的知识，希望对各位有所帮助！

牛骨膏汤的作用

牛骨为牛科动物黄牛或水牛的骨骼。牛骨含多量的脊髓组织及无机化合物等营养成份，可入药。

牛骨高汤的做法

1.牛骨洗净放在国内加入适量水（放了2/3锅的水）

2.中火煮开并撇去血沫子

3.转小火炖1个多小时（顿了差不多4-5个小时）最后撇去最上方的油！

蚕丝蛋白水解液怎样制备越详细越好,非常谢谢!

1材料和方法

1.1实验材料

1.1.1原辅材料

蚕丝、葛根、枳枸子、乌梅均购于徐州市场。蔗糖、中性蛋白酶（130000u/g）、胰蛋白酶（4000u/g）由实验室提供，木瓜蛋白酶（650000u/g）由广西海发生物酶制品厂提供。

1.1.2主要试剂

甲醛试剂、浓硫酸、浓盐酸、氢氧化钠、无水硫酸钠、无水氯化钙、氯水、邻二甲酸氢钾、甲基红、硫酸铜、硼酸、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、食盐、731及723阴阳离子交换树脂和混合提示剂：1体积的亚甲基蓝和2体积的甲基红指示剂的混合物。

1.1.3主要设备

电热恒温干燥箱、电热恒温培养箱、多功能粉碎机、低速大量离心机、架盘天平、磁力搅拌器、精密pH计、电子天平、数显恒温水浴锅、手提式压力蒸汽灭菌锅、电磁炉。

1.2实验方法

1.2.1工艺流程

（1）采用酸解液调配饮料的工艺流程

蚕丝脱胶→酸解→阳离子交换树脂脱酸→丝素氨基酸

中草药→清洗→浸提→粗滤→离心调配→

香精、VC、蔗糖等

灌装→封口→杀菌→冷却→感官鉴评及卫生检测→成品

（2）采用酶解液调配饮料的工艺流程

蚕丝脱胶→CaCl2溶解丝素→酶解→灭酶→去CaCl2→丝素氨基酸

中草药→清洗→浸提→粗滤→离心→调配→灌装

香精、VC、蔗糖等

→封口→杀菌→冷却→感官鉴评及卫生检测→成品

1.2.2蚕丝脱胶的方法

将洗净烘干后的蚕丝在Na2CO3溶液（0.4%，0.5%，0.6%）煮沸处理（20min，30min，40min），确定最佳脱胶条件。

1.2.3丝素酸解的方法

将脱胶后的丝素烘干做单因素实验。先选酸度为3M，固液比1∶50，111℃下酸解15h，测定每小时的氨基酸含量，可得到酸解时间的适宜范围；再选定固液比1∶50，酸解时间在以上确定范围内，110℃下采取1.0M、1.5M、2.0M、2.5M、3.0M、3.5M、4.0M、4.5M、5.0M等不同浓度酸解，可选出适宜的酸浓度范围；最后选定酸浓度与时间在适宜范围内，通过选定不同固液比1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60、1∶70、1∶80，确定最适宜固液比范围。将得到的酸浓度、固液比、酸解时间分别在适范围内选3个水平做3因素3水平的正交实验，由此来找出最佳酸解条件。

1.2.4丝素在CaCl2中的溶解

配制不同浓度（30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、）的CaCl2溶液，测定丝素在其中的溶解效果，找出溶解丝素的CaCl2最佳浓度。

1.2.5酶解工艺的研究方法（1）最佳水解酶选择。使蚕丝蛋白液在3种蛋白酶的最适加酶量、酶解温度、酶解pH值及相同酶解时间下进行酶解，比较3种酶的酶解效果，根据氨基酸得率选出水解效果最好的酶。（2）酶解条件确定。根据以上实验所确定的最佳丝素蛋白酶，分别对底物浓度，pH值、温度确定3个水平做正交实验，以此来确定酶解最佳条件。底物浓度分别为4%、5%、6%，pH值分别为5.0，5.5、6.0，酶解温度分别为50℃、55℃、60℃。

1.2.6酸解液脱酸

采用732型强酸型阳离子交换树脂对酸解液进行脱酸，待流出液使茚三酮呈紫色反应时，停止上柱，用去离子水洗涤离子交换柱，至流出液近中性，再用0.5M氨水洗脱氨基酸，至不使茚三酮显紫色为止。

1.2.7中草药汁的提取

将洗净的中草药与纯净水按1∶10的比例在90℃水浴锅中浸提1h，得到虑液，再在残渣中加入8倍量的纯净水于90℃水浴中浸提0.5h，把滤液与残渣液合并后经低速大容量离心机离心后备用。

1.2.8饮料的调配

设计1个3因素3水平的正交试验来选择饮料的配方。为了对饮料进行评分，需按制品的色泽、香气、滋味和组织状态确定一个评分标准。

1.2.9饮料杀菌及卫生检测

饮料杀菌：将成品分别在90℃下杀菌15min、20min、25min，然后置于37℃恒温水浴培养箱中观察其稳定性，选择最佳杀菌时间。细菌总数的测定采用平板菌落计数法。

1.3检测项目及方法

蚕丝中粗蛋白的测定用微量凯氏定氮法。氨基氮含量的测定用甲醛电位法。

1.3.1丝素酶解液脱酸效果的检验

采用732型强酸型阳离子交换树脂，放入高40cm，Φ15的树脂柱中，待流出液使茚三酮呈紫色，说明树脂已饱和，氨基酸液流出，此时停止上柱，用去离子水洗涤离子交换柱，至流出液近中性，再用0.5M氨水洗脱氨基酸，至不使茚三酮呈色反应，说明氨基酸已脱尽。

1.3.2阴阳离子交换树脂去离子效果的检测

将用CaCl2溶液溶解后的丝素蛋白液选经过柱高40cm，Φ15的阳离子交换树脂柱去Ca2+，用NaOH溶液检测流出液中有无Ca2+，当无白色沉淀出现时，再经过柱高40cm，Φ15的阴离子交换树脂去除Cl-，用AgNO3检测流出液中有无Cl-，当无白色沉淀出现时停止上柱。

2结果与讨论

2.1蚕丝脱胶条件的确定

蚕丝中次要成分主要分布在丝胶蛋白中，为保证丝素氨基酸的质量，必须进行脱胶。丝素不溶于水，而丝胶是水溶性的。尽管丝胶有亲水性，但要在水介质中将它与丝素分离开来需很长时间，且要高温处理，为此采用Na2CO3作分离介质。其中丝胶蛋白脱去率（%）=丝胶液中蛋白质含量（g）×100%丝胶蛋白总量（g）。试验结果如表1。

表1Na2CO3解脱丝素蛋白正交实验设计方案及结果

处理时间（min）浓度（%）丝胶脱去率（%）

11（20）1（0.4）48.5

212（0.5）35.7

313（0.6）59.8

42（30）160.3

522100

623100

73（40）173.9

832100

933100

由表1可以看出，在0.5%NaCO3溶液中中煮沸30min脱胶效好最好。在煮沸时为防止水分蒸分，影响NaCO3浓度，需在容器上加盖子。蚕丝脱胶后即为丝素蛋白，丝胶蛋白存在于水介质中。

2.2酸解单因子实验

用1g丝素在3MH2SO4，固液比1∶60，110℃下水解。从实验中发现丝素在H2SO4中3h才能完全溶解。测定4～15h的水解情况可知，氨基酸在8～10h含量较高，10h后变化很小，甚至开始减小。

用丝素在固液比1∶60，110℃下酸解8h，比较不同H2SO4浓度与氨基氮含量的关系，结果酸解浓度太低或太高都会影响氨基酸含量，控制在3M～4M较好。

用丝素在3MH2SO4，110℃下酸解8h，测固液比对酸解的影响，由于丝素至少1∶20的固液比才能浸泡，以此为最小固液比。结果固液比在1∶50～1∶70时水解效果最好。

2.3酸解正交试验

从酸解单因素实验中得知影响酸解的因素主要是酸浓度、固液比、时间，由此选定各因素的3个水平，实验结果如表2。

表2酸解正交试验结果与分析

所在列ABC

因素时间（h）酸渡度（M）固液化氨基酸得率（%）

实验11（8）1（3）1（1∶50）69.1

实验22（9）2（3.5）2（1∶60）73.2

实验33（10）3（4）3（1∶70）71.9

实验421287.2

实验522389.1

实验623186.5

实验731378.4

实验832180.3

实验933279.6

均值171.40078.23378.633

均值287.60080.86780.000

均值379.43379.33379.800

极差16.2002.6341.367

由表2得酸解得率最高组合为A2B2C3，但从表4中得理想组合为A2B2C2，所以再做A2B2C2对照，结果测得丝素氨基酸得率为89.8%，比A2B2C3稍好，所以确定酸解最佳条件为酸浓度为3.5M，固液比1∶60，110℃下酸解9h。

2.4CaCl2溶解丝素结果

丝素在CaCl2溶液中的溶解特性较为特别，浓度低于35%或高55%时几乎不溶解，如表3，以40%为最佳。

表3CaCl2浓度与丝素溶解关系

12345678

CaCl2浓度30%35%40%45%50%55%60%65%

丝素溶解度014.5%100%32.5%15.5%000

2.5最佳水解酶确定

木瓜蛋白酶pH控制在6.0，温度为50℃，E/S=10%，底物浓度即丝素蛋白浓度为4%，进行酶解。实验表明：前1h酶解速度增加很快，3h达到0.07mg/ml，以后增加缓慢。胰蛋白酶在pH8.0，温度40℃，E/S=2%，丝素蛋白浓度为4%下进行酶解。7h达到最大值0.053mg/ml。中性蛋白酶在pH7.0，温度50℃，E/S=2%，丝素蛋白浓度为4%下酶解，3h达到0.065mg/ml。由此可知，木瓜蛋白酶水解效果最好。

2.6木瓜蛋白酶水解丝素蛋白正交实验

做正交试验确定木瓜蛋白酶水解丝素蛋白的最佳条件组合。木瓜蛋白酶最佳酶解条件为pH5.5，温度55℃，底物浓度为5%，加酶量为10%。最终1.001g丝素蛋白可得0.184g氨基酸。从丝素的酸解、酶解比较得出，酸解明显比酶解好。

2.7饮料调配

饮料的制作应注意风味的调整，影响本饮品风味的主要因素为氨基酸浓度、中草药浓度、糖浓度，因此设计1个3因素3水平的正交试验来优选饮料的配方。如表4。

表4饮料调配结果与分析

所在列ABC

因素氨基酸中草药糖浓度（%）实验结果

浓度（%）浓度（%）

实验11（0.3）1（2）1（8）7.8

实验212（3）2（9）7.4

实验313（4）3（10）7.2

实验42（0.4）129

实验52238.5

实验62318

实验73（0.5）137.6

实验83217

实验93327.5

均值17.4678.1337.600

均值28.5007.6337.967

均值37.3677.5677.767

极差1.1330.5660.367

由表4可得饮品的最佳调配配方：氨基酸浓度为0.4%，中草药汁浓度为2%，糖浓度为9%，再加少量水蜜桃香精及VC即得成品。

2.8饮品的贮藏稳定性试验

本试验在装罐前、后都进行杀菌，且对中草药汁进行离心，故得到的饮品澄清透明。在装罐后通过不同杀菌时间，观察其稳定性。分别在90℃条件下杀菌15min、20min、25min，冷却后置于37℃恒温培养箱内观察。9d后均无变化，仍是澄清透明的黄褐色溶液。

为了确定最佳杀菌时间，将保藏9d后的成品做细菌检测实验，结果是90℃杀菌25min细菌总数为56个/ml，满足国标要求。

3产品质量标准

3.1感官指标

色泽：黄褐色，均匀一致。风味：酸甜可口，有轻微的丝素氨基酸和中草药的苦涩味，无异味。组织形状：汁液透明，无杂质，久置后也无沉淀出现。

3.2理化指标

酸度：pH3.5～4.0，总菌数≤100个/ml，大肠菌数≤3个/ml，致病菌不得检出。

4结论

丝素酸解比酶解的氨基酸得率高，酸解得率达89.1%，而酶解只有18.1%。由于酸解比酶解操作简便且水解液色泽、气味均较好，所以在制作饮料时采用酸解液。确定的最佳脱胶条件为0.5%的Na2CO3煮沸处理30min，在此条件下丝胶全部脱除且丝素没有损失。脱胶后丝素经洗涤烘干处理后进行酸解，得到酸解最佳工艺条件为3.5MH2SO4，固液比1∶60，110℃下水解9h，氨基酸得率高达89.8%。将阳离子交换树脂脱酸的氨基酸溶液与中草药进行调配，得到饮料的最佳调配方案为丝素氨基酸浓度0.4%，中草药浓度2%，糖浓度9%，VC浓度0.2%。由此制得澄清透澈、酸甜可口的黄褐色饮品。

发酵生产如何确定最佳培养基配方

培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的、按一定比例配制的多种营养物质的混合物。培养基组成对菌体生长繁殖、产物的生物合成、产品的分离精制乃至产品的质量和产量都有重要的影响。微生物的营养活动是依靠向外界分泌大量的酶，将周围环境中大分子蛋白质、糖类、脂肪等营养物质分解成小分子化合物，借助于细胞膜的渗透作用，吸收这些小分子营养物质来实现的。不同的微生物的生长情况不同或合成不同的发酵产物时所需的培养基有所不同，但对于所有发酵生产用培养基的设计仍存在某些共同点可供遵循，这就是所有的发酵培养基都必须提供微生物生长繁殖和产物合成所需的碳源、氮源、无机元素、生长因子、水和氧气等。对于大规模发酵生产，除考虑上述微生物的需要外，还必须重视培养基原料的价格和来源。

培养基的选择

不同的微生物对培养基的需求是不同的，因此，不同微生物培养过程对原料的要求也是不一样的。应根据具体情况，从微生物营养要求的特点和生产工艺的要求出发，选择合适的营养基，使之既能满足微生物生长的需要，又能获得高产的产品，同时也要符合增产节约、因地制宜的原则。

1、根据微生物的特点选择培养基

用于大规模培养的微生物主要有细菌、酵母菌、霉菌和放线菌等四大类。它们对营养物质的要求不尽相同，有共性也有各自的特性。在实际应用时，要依据微生物的不同特性，来考虑培养基的组成，对典型的培养基配方需作必要的调整。

2、根据发酵方式选择培养基

液体和固体培养基各有用途，也各有优缺点。在液体培养基中，营养物质是以溶质状态溶解于水中，这样微生物就能更充分接触和利用营养物质，更有利于微生物的生长和更好地积累代谢产物。工业上，利用液体培养基进行的深层发酵具有发酵效率高，操作方便，便于机械化、自动化，降低劳动强度，占地面积小，产量高等优点。所以发酵工业中大多采用液体培养基培养种子和进行发酵，并根据微生物对氧的需求，分别作静止或通风培养。而固体培养基则常用于微生物菌种的保藏、分离、菌落特征鉴定、活细胞数测定等方面。此外，工业上也常用一些固体原料，如小米、大米、麸皮、马铃薯等直接制作成斜面或茄子瓶来培养霉菌、放线菌。

3、从生产实践和科学试验的不同要求选择

生产过程中，由于菌种的保藏、种子的扩大培养到发酵生产等各个阶段的目的和要求不同，因此，所选择的培养基成分配比也应该有所区别。一般来说，种子培养基主要是供微生物菌体的生长和大量增殖。为了在较短的时间内获得数量较多的强壮的种子细胞，种子培养基要求营养丰富、完全，氮源、维生素的比例应较高，所用的原料也应是易于被微生物菌体吸收利用。常用葡萄糖、硫酸铵、尿素、玉米浆、酵母膏、麦芽汁、米曲汁等作为原料配制培养基。而发酵培养基除需要维持微生物菌体的正常生长外，主要是要求合成预定的发酵产物，所以，发酵培养基碳源物质的含量往往要高于种子培养基。当然，如果产物是含氮物质，应相应地增加氮源的供应量。除此之外，发酵培养基还应考虑便于发酵操作以及不影响产物的提取分离和产品的质量。

4、从经济效益方面考虑选择生产原料

从科学的角度出发，培养基的经济性通常是不被那么重视，而对于生产过程来讲，由于配制发酵培养基的原料大多是粮食、油脂、蛋白质等，且工业发酵消耗原料量大，因此，在工业发酵中选择培养基原料时，除了必须考虑容易被微生物利用并满足生产工艺的要求外，还应考虑到经济效益，必须以价廉、来源丰富、运输方便、就地取材以及没有毒性等为原则选择原料。

培养基的配制原则

培养基的配制必须提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分;有利于减少培养基原料的单耗，单位营养物质所合成产物数量大或产率大;有利于提高培养基产物的浓度，以提高单位容积发酵罐的生产能力;有利于提高产物的合成速度，缩短发酵周期;尽量减少副产物的形成;减少对发酵过程中通气搅拌的影响，有利于提高氧的利用率、降低能耗;有利于产品的分离和纯化;并尽可能减少产生“三废”的物质。

当然，设计任何一种培养基都不可能面面俱到地满足上述各项要求，需根据具体情况，抓主要环节。使其即满足微生物的营养要求，又能获得优质高产的产品，同时也符合增产节约、因地制宜的原则。发酵培养基的主要作用是为了获得预期的产物，必须根据产物特点来设计培养基。因此要求营养要适当丰富和完备，菌体迅速生长和健壮，整个代谢过程pH值适当且稳定;糖、氮代谢能完全符合高单位罐、批的要求，能充分发挥生产菌种合成代谢产物的能力。此外还要求成本降低。

1、根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基

不同的微生物所需要的培养基成分是不同的，要确定一个合适的培养基，就需要了解生产用菌种的来源、生理生化特性和一般的营养要求，根据不同生产菌种的培养条件、生物合成的代谢途径、代谢产物的化学性质等确定培养基。

2、营养成分的恰当配比

微生物所需的营养物质之间应有适当的比例，培养基中的碳氮的比例(C/N)在发酵工业中尤其重要。不同的微生物菌种、不同的发酵产物所要求的碳氮比是不同的。菌体在不同生长阶段，对其碳氮比的最适要求也不一样。培养基的碳氮比不仅会影响微生物菌体的生长，同时也会影响到发酵的代谢途径。由于碳既作碳架又作能源，所以用量要比氮多。从元素分析来看，酵母细胞中碳氮比约为100:20，霉菌约为100:10。一般发酵工业中培养基碳氮比约为100:(0.2～2.0)，但在氨基酸发酵中，因为产物中含有氮，所以碳氮比就相对高一些。如谷氨酸发酵的碳氮比为100:(15～21)，若碳氮比为100:(0.2～2.0)，则会出现只长菌体，几乎不产谷氨酸的现象。

碳氮比随碳水化合物及氮源的种类以及通气搅拌等条件而异，很难确定统一的比值。一般情况下，碳氮比偏小，能导致菌体的旺盛生长，易造成菌体提前衰老自溶，影响产物的积累;碳氮比过大，菌体繁殖数量少，不利于产物的积累;碳氮比较合适，但碳源、氮源浓度高，仍能导致菌体的大量繁殖，增大发酵液粘度，影响溶解氧浓度，容易引起菌体的代谢异常，影响产物合成;碳氮比较合适，但碳源、氮源浓度过低，会影响菌体的繁殖，同样不利于产物的积累。

3、渗透压

配制培养基时，应注意营养物质要有合适的浓度。营养物质的浓度太低，不仅不能满足微生物生长对营养物质的需求，而且也不利于提高发酵产物的产量和提高设备的利用率。但是，培养基中营养物质的浓度过高时，由于培养基溶液的渗透压太大，会抑制微生物的生长。此外培养基中的各种离子的浓度比例也会影响到培养基的渗透压和微生物的代谢活动，因此，培养基中各种离子的比例需求要平衡。在发酵生产过程中，在不影响微生物的生理特性和代谢转化率的情况下，通常趋向在较高浓度下进行发酵，以提高产物产量，并尽可能选育高渗透压的生产菌株。当然，培养基浓度太大会使培养基黏度增加和溶氧量降低。

4、pH值

各种微生物的正常生长均需要有合适的pH值，一般霉菌和酵母菌比较适于微酸性环境，放线菌和细菌适于中性或微碱性环境。为此，当培养基配制好后，若pH值不合适，必须加以调节。当微生物在培养过程中改变培养基的pH值而不利于本身的生长时，应以微生物菌体对各种营养成分的利用速度来考虑培养基的组成，同时加入缓冲剂，以调节培养液的pH值。

5、氧化还原电位

对大多数微生物来说，培养基的氧化还原电位一般对其生长的影响不大，即适合它们生长的氧化还原电位范围较广。但对于厌氧菌，由于氧的存在对其有毒害作用，因而往往在培养基中加入还原剂以降低氧化还原电位。

在配制培养基时，除应注意以上几条原则外，还要考虑到营养成分的加入顺序，为了避免生成沉淀而造成营养成分的损失，加入的顺序一般为先加入缓冲化合物，溶解后加入主要物质，然后加入维生素、氨基酸等生长素类的物质。

关于牛肉膏蛋白质的配方，牛骨膏汤的作用的介绍到此结束，希望对大家有所帮助。