营养限制性培养牛血清浓度(会大量得到哪个时期的细胞)

大家好，营养限制性培养牛血清浓度相信很多的网友都不是很明白，包括对细胞进行营养限制性培养,会大量得到哪个时期的细胞也是一样，不过没有关系，接下来就来为大家分享关于营养限制性培养牛血清浓度和对细胞进行营养限制性培养,会大量得到哪个时期的细胞的一些知识点，大家可以关注收藏，免得下次来找不到哦，下面我们开始吧！

对细胞进行营养限制性培养,会大量得到哪个时期的细胞

哺乳动物细胞需要促有丝分裂因子（如血清）才能经过G1期进入周期当细胞经过了G1晚期的关卡后便能够不依赖外源促有丝分裂因子的刺激而自主进入周期【6】降低血清浓度会使G1晚期之前的细胞缺乏促有丝分裂因子而停滞于G1期其它细胞则在自主完成分裂后进入分裂的状态即G0期由于流式细胞术分析不能将两者严格区分开因此细胞便被同步为G0/G1期若再给予足够的血清刺激细胞则能够以较多为同步的状态继续进入细胞周期由于培养过程中通过降低血清浓度限制了细胞增殖所必需的某些营养因此教材中将这种培养方式称为营养限制性培养

（2）具体操作方法

取处于指数生长期的细胞用含0.5%-1%小牛血清的培养基培养48-72h或无血清培养基培养24h接着用0.1%-0.25%胰蛋白酶消化处理离心收集细胞然后经Pl染色后用流式细胞分析仪分析细胞周期各时相的细胞百分数实验表明血清浓度饥饿时间和细胞传代阶段等因素都会影响细胞同步化的效果需根据实际需要选择合适的方案

另外值得注意的是虽然适当延长饥饿时间过长不仅不会使G0/G1期细胞的比例进一步提高反而会造成大量DNA断裂引发细胞凋亡

小牛血清和胎牛血清有何区别呢,完全培养基DMEM到底加哪种

完全培养基DMEM加胎牛血清。

小牛血清和胎牛血清的区别：

1、来源不同：

（1）小牛血清取自出生10－30天的小牛，出生三月龄小牛动脉采血分离血清。

（2）胎牛血清是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。

2、品质不同：

（1）小牛血清品质不如胎牛血清。

（2）胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。

3、用途与用法不同：

（1）小牛血清而有些细胞只需小牛血清即可。

（2）胎牛血清某些细胞必需胎牛血清才能生长。

4、外观不同：

（1）小牛血清外观黄色澄清，微溶血，有异物稍粘稠液体。

（2）胎牛血清是一种性状，外观浅黄色澄清，无溶血，无异物稍粘稠液体。

扩展资料

1、牛血清的功能：

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。

（1）提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

（2）提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

（3）有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

（4）是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

（5）起酸碱度缓冲液作用。

（6）提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

2、解冻血清注意事项：避免产生沉淀物

（1）解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃，实验显示非常容易产生沉淀物。

（2）解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生

（3）请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。

（4）血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

（5）若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理。欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

参考资料来源：百度百科-胎牛血清

百度百科-血清

有关培养基的知识!

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。

简介

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含

培养基

有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及生长素和水等。有的培养基还含有抗菌素、色素、激素和血清。

培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在2~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。

化学分类

固体培养基

天然培养基

指一类利用动、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基等。

组合培养基

又称为合成培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。如葡萄糖铵盐培养基、淀粉硝酸盐培养基等。

半组合培养基

指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如，马铃薯蔗糖培养基。

物理分类

液体培养基

一类配制成的液体状态的基质。

液体培养基

固体培养基

一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。

半固体培养基

指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。

脱水培养基

又称预制干燥培养基，指含有除水分外的一切成分的商品培养基。

微生物分类

选择性培养基：一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。

鉴别培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。例如，伊红美蓝乳糖培养基（EMB）。

常见培养基

细菌培养基

牛肉膏琼脂培养基

牛肉膏0.3g，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，琼脂1.5g，水100ml

在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌：1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15~30分钟。

马铃薯培养基

取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在

细菌培养基

烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。

根瘤菌培养基

葡萄糖10g磷酸氢二钾0.5g碳酸钙3g硫酸镁0.2g酵母粉0.4g琼脂20g水1000ml1%结晶紫溶液1ml

先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。

放线菌培养基

淀粉硝酸盐培养基（高氏一号培养基）

可溶性淀粉2.0g硝酸钾0.1g磷酸氢二钾0.05g氯化钠0.05g硫酸镁0.05g硫酸亚铁0.001g琼脂2g水100ml

先把淀粉放在烧杯里，用5毫升水调成糊状后，倒入95毫升水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。调整pH值到7.2～7.4，分装后灭菌，备用。

面粉琼脂培养基

面粉60g琼脂20g水1000ml

把面粉用水调成糊状，加水到500ml，放在文火上煮30分钟。另取500ml水，放入琼脂，加热煮沸到溶解后，把两液调匀，补充水分，调整pH值到7.4，分装，灭菌，备用。

微藻培养基

BG-11培养基

NaNO31.5gK2HPO4·3H2O0.04gMgSO4·7H2O0.075gCaCl2·2H2O0.036gCitricAcid（柠檬酸）0.006gFerricammoniumcitrate（柠檬酸铁铵）0.006gEDTA(dinatrium-salt)0.001gNa2CO30.02gA5+Cosolution*（A5溶液1000×）1mlDistilledWater（蒸馏水）919ml

SE培养基

NaNO3

0.25g

K2HPO4.3H2O

0.075g

MgSO4.7H2O

0.075g

CaCl2.2H2O

0.025g

KH2PO4

0.175g

NaCl

0.025

Soilextract

40ml

FeCl3·6H2O

0.005

Fe—EDTA

1ml

A5solution1000×

1ml

distilledwater

958ml

SoilExtract(土壤提取液)配置方法

取花园土未施过肥0。5kg置于烧杯或三角瓶中，加入蒸馏水1000毫升，瓶口用透气塞封口，在水浴中沸水加热2小时，冷却数小时，在无菌条件下过滤，取上清液，将灭菌蒸馏水加入上清液至总体积1000毫升。土壤提取液保存在4ºC备用。

CompositionoftheA5solution

Addto100mlofdistilledwater:

H3BO3

286mg

MnCl2.4H2O

181mg

ZnSO4.7H2O

22mg

CuSO4.5H2O

7.9mg

(NH4）6Mo7O24.4H2O

3.9mg

EDTA-Fe的配置方法：

将EDTA和FeCl3·6H2O分别溶于水和HCl(0.1N),混匀即可。

Na2EDTA

1g

distilledwater

50ml

FeCl3·6H2O

81mg

HCl（0.1N）

50ml

Pr培养基

Preparation:to997mLofglass-distilledwater,add1.0gproteosepeptone,15.0gagar,andthefollowingstocksolutions:

workingsolution

g/1000mLH2O

NaNO3

0.25

CaCl2.2H2O

0.025

MgSO4.7H2O

0.075

K2HPO4

0.075

KH2PO4

0.175

NaCl

0.025

A5solution

1ml

EDTA-Fe

1ml

FeCl3(0.05%)

1ml

A5溶液和EDTA-Fe溶液配制方法同上。

真菌培养基

萨市（Sabouraud’s）培养基

蛋白胨10g琼脂20g麦芽糖40g水1000ml

先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40g麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。

本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。

马铃薯糖琼脂培养基

把马铃薯洗净去皮，取200g切成小块，加水1000ml，煮沸半小时后，补足水分。在滤液中加入10g琼脂，煮沸溶解后加糖20g（用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖），补足水分，分装，灭菌，备用。

把这培养基的pH值调到7.2～7.4，配方中的糖，如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。

豆芽汁培养基

黄豆芽100g琼脂15g葡萄糖20g水1000ml

洗净黄豆芽，加水煮沸30分钟。用纱布过滤，滤液中加入琼脂，加热溶解后放入糖，搅拌使它溶解，补足水分到1000ml，分装，灭菌，备用。

把这培养基的pH值调到7.2～7.4，可用来培养细菌和放线菌。

豌豆琼脂培养基

豌豆80粒琼脂5g水200ml

取80粒干豌豆加水，煮沸1小时，用纱布过滤后，在滤液中加入琼脂，煮沸到溶解，分装，灭菌，备用。

琼脂

食用菌菌种培养基

马铃薯-蔗糖-琼脂培养基

20%马铃薯煮汁1000ml蔗糖20g琼脂18g

把马铃薯洗净去皮后，切成小块。称取马铃薯小块200g，加水1000ml，煮沸20分钟后，过滤。在滤汁中补足水分到1000ml，即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，补足水分，分装，灭菌，备用。使用该培养基对pH值要求不严格，可以不测定。

综合马铃薯培养基

20%马铃薯煮汁1000ml磷酸二氢钾3g硫酸镁1.5g葡萄糖20g维生素10mg琼脂18g

先配制20%马铃薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各种组分，加热溶解后补足水分，调整pH值到6。分装，灭菌，备用。该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。

烟草的培养基

在植物组织培养时，通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽。CTK/IAA高时,愈伤组织分化芽

CTK/IAA低时，分化根；CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化

愈伤组织诱导培养基制备

以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后，再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水，加入40g蔗糖后搅拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0.加入14g琼脂，将铝锅置于电炉上,搅拌加热使琼脂完全溶化，然后用蒸馏水定容至终体积2L,继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中。

烟草叶片愈伤组织诱导

烟草

取一无菌培养皿，用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中,并用解剖刀将叶片切成2mm2左右的小片，然后将其接种于准备好的培养基上,每瓶接种5小片，一共接种6瓶。接种后的三角平置于24条件下黑暗培养1周,然后在同样温度下有光照和全黑暗下培养3周直至愈伤组织形成(两种情况各置3瓶).观察愈伤组织诱导结果，统计愈伤组织诱导率。

器官分化及植株再生培养

将诱导的愈伤组织按类型分别转入分化培养基上,置于连续光照，温度20-22C条件下培养3周,统计愈伤组织再生植株情况.

愈伤组织诱导的总体情况

烟草愈伤组织诱导培养4周后,愈伤组织基本形成，即排除因生长时间不够而未形成愈伤的情况。具体情况见表一中所示,6瓶培养物均有愈伤形成，且都未发生污染,但诱导率几乎各不相同.其中，在光照条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为60.0℅,在黑暗条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为46.7%.由于实验过程中，外植体即烟草叶片取得偏小,接种时可能已有部分外植体的大部分细胞脱水死亡，使整个实验的愈伤组织诱导率偏低,愈伤块偏小。

动物细胞培养基

RPMI1640培养基是一个全营养型培养基，广泛应用于哺乳动物细胞和杂交瘤细胞的培养，如人骨髓瘤细胞、鼠杂交瘤细胞、人白细胞以及B细胞和T细胞。最初设计用于悬浮细胞培养和人白血病细胞的单层细胞培养。

特殊培养基

选择性培养基

选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。

酵母菌富集培养基

葡萄糖5%尿素0.1%硫化铵0.1%磷酸二氢钾0.25%磷酸氢二钠0.05%七水合硫酸镁0.1%七水合硫酸铁0.01%酵母膏0.05%孟加拉国红0.003%pH4.5

Ashby无氮培养基

富集好氧自生固氮菌

甘露醇1%磷酸二氢钾0.02%七水合硫酸镁0.02%氯化钠0.02%二水合硫酸钙0.01%碳酸钙0.5%

鉴别培养基

EMB培养基

常用于鉴别E.coli

蛋白胨10g乳糖5g蔗糖5g磷酸氢二钾2g伊红Y0.4g美蓝0.065g蒸馏水1000gpH7.2

2216E培养基配方

分离海洋微生物的培养基配方

蛋白胨5g酵母膏1g磷酸高铁0.01g琼脂15~20g陈海水1000ml煮沸氢氧化钠（5%）的溶液调PH值7.6~7.8

伊红美蓝培养基

可用于检测水中大肠杆菌的含量

首先按以下组成配制基础培养基。

蛋白胨10gNaCl5g

琼脂15~20g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mL，调节pH为7.6.灭菌后，冷却至60℃左右，再按下面的比例，在无菌操作条件下加入灭菌的乳糖溶液、伊红水溶液以及美蓝水溶液。摇匀后，立即倒平板。溶液中的乳糖在高温下会破坏，因此一般使用压力为70kPa、温度为115℃的条件灭菌20min.

基础培养基100mL20%乳糖溶液2mL

2%伊红水溶液2mL0.5%美蓝水溶液1mL

天然细胞培养基——血清

天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期，体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大，因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。

血清种类

目前用于组织培养的血清主要是牛血清，培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因：来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的，但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，具有极为重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是质量最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。

血清的主要成分

血清样本

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。

血清主要作用

1．提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。

2．提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（氢化可的松、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。

3．提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。

4．提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。

5．对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解毒中起重要作用，如SeO3,硒等。

血清培养基主要问题

1．血清的成份可能有几百种之多，目前对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚，尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识，这给研究工作带来许多困难。

2．血清都是批量生产，各批量之间差异很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保证每批血清的相似性极为困难，从而使实验的标准化和连续性受到限制。

3．对大多数细胞，在体内状态，血清不是它们接触的生理学液体，只是在损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清，因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态，血清可能促进某些细胞的生长（成纤维细胞）同时抑制另一类细胞生长（表皮细胞）。

4．血清含一些对细胞产生毒性的物质，如多胺氧化酶，能与来自高度繁殖细胞的多胺反应（如精胺、亚精胺）形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长，甚至造成细胞死亡。

5．动物个体不同，血清产地、批号不同，每批质量差异甚大，其成分不能保持一致。

6．取材中可能带入支原体、病毒，对细胞产生潜在影响，可能导致实验失败或实验结果不可靠性。

7．大规模生产中，血清来源越来越困难，价格昂贵，是构成动物细胞培养对生产成本的主要部分之一。

血清的质量标准

血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。WHO公布的《用动物细胞体外培养生产生物制品规程》中的要求：

1．牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。

2．有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。

3．证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。

4．血清要通过滤膜过滤除菌，保证无菌。

5．无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染，有些国家要求无细菌噬菌体污染。

6．对细胞有良好的支持繁殖作用。

我国在对牛血清的质量2000年版《中国生物制品主要原辅料质控标准》中提出比较严格的标准要求。包括蛋白质含量，细菌、真菌、支原体、牛病毒、大肠杆菌噬菌体、细菌内毒素，支持细胞增殖检查。

外周血培养基配制

一、配制用水

培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万奥姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的

双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。

二、培养基

培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2～7.4，若pH值超

过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。

三、血清

培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含

量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。

四、抗菌素

为防止培养时期细菌的污染，可在培养基中添加适当抗菌素，一般用量与组织细胞培养相同：卡那霉素100单位/毫升，或双抗--青霉素100单位/

毫升，链霉素100微克/毫升。

五、植物血凝素（PHA）

非增殖期的细胞不能制备染色体，如人外周血淋巴细胞，但在离体培养过程中，在PHA的作用下，可被刺激转化为淋巴母细胞而进入有丝分裂。

经实验测定其分裂高峰分别于培养后44—48小时和68—72小时。

PHA有粘多糖，蛋白质两种重要成分。粘多糖促使有丝分裂，蛋白质起凝集作用。PHA激活的细胞数随其浓度而增加，直至全部免疫活性细胞均

被激活为止，但PHA浓度过高会引起凝集，一般采用4%浓度为好。

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