培养牛支原体的平板(病原微生物接种时需要选择什么样的琼脂平板)
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肺炎支原体的培养基和血平板
M.pneumoniaecellswereculturedat37°Cundera5%CO2atmospherefor7daysinPPLObrothcontainingmycoplasmasupplement-G(Oxoid)forthepreparationofsolubleM.pneumoniaeantigens.
配制PPLO固体培养基：PPLO肉汤21g/L,5%水解乳蛋白Hank‘s液400ml/L，0.4%酚红5ml/L,1.5%琼脂，300ml蒸馏水，马血清200ml/L,丙酮酸钠2g/L,青霉素20万单位，葡萄糖4g/L。首先将PPLO肉汤、水解乳蛋白Hank’s液、酚红、蒸馏水混合，调节PH至7.6-7.8，高压121℃灭菌25min，酵母浸液采用同样的步骤，单独高压。接着，用0.45μm的细菌滤器过滤马血清，然后56℃水浴灭活30min。待PPLO肉汤混合液和酵母浸液冷却至70℃左右，无菌操作依次加入灭活马血清、葡萄糖、丙酮酸钠、青霉素（这些物质均不可高压）。
鸡毒支原体结晶紫血清平板凝集试验抗原中的结晶紫怎么配置
1．在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104～10×4WEHI-164细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），37℃5％CO2的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。
2．用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3～5倍递次稀释待检样品，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个，3个阳性对照孔各加0.1ml含4μgTNF的RPMI-1640培养液，3个阴性对照孔各加100μlRPMI-1640培养液。继续培养18～24小时。
3．甩去培养液，用PBS小心洗涤一次，每孔加0.1ml10％甲醇溶液固定细胞30秒钟。
4．吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml结晶紫染液，室温中放置20分钟。
5．轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。
6．测定前，每孔加0.1ml33％醋酸脱色，充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度（OD）值对样品稀释度作图，比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活性
病原微生物接种时需要选择什么样的琼脂平板
病原微生物接种时需含有碳源、氮源、无机盐、水的琼脂平板。
在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点。
各自独立形成菌落后，来观察、研究形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。
扩展资料：
病原微生物接种介绍如下：
做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。
专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴肾等；也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。
参考资料来源：新华网-卫计部门发布提示：接种流感疫苗正当时
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