牛肉膏蛋白胨培养基的性状,牛肉膏蛋白胨培养出来的土壤中的细菌菌落特征
其实牛肉膏蛋白胨培养基的性状的问题并不复杂,但是又很多的朋友都不太了解牛肉膏蛋白胨培养出来的土壤中的细菌菌落特征,因此呢,今天小编就来为大家分享牛肉膏蛋白胨培养基的性状的一些知识,希望可以帮助到大家,下面我们一起来看看这个问题的分析吧!
牛肉膏蛋白胨培养出来的土壤中的细菌菌落特征
各菌苔间不会产生明显界限。牛肉膏蛋白胨含有着大量的营养,它培养出来的土壤中的细菌菌落特征从背面观察菌落,菌落边缘整齐,各菌苔间不会产生明显界限。在普通牛肉膏培养基上自由形成的菌苔较小,呈点状,大量生长时可观察到菌苔融合,各菌苔间不会产生明显界限。背面观察菌落,菌落边缘整齐。
高氏1号培养基 和牛肉膏蛋白胨的特点各是什么
高氏1号培养基是分离和培养放线菌的合成培养基。这种培养基是由可溶性淀粉(作为碳源),KNO3(作为氮源),NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O(作为无机盐,为微生物提供钠、钾、磷、镁、硫等离子)和FeSO4·7H2O(作为微生物的微量元素,提供铁离子)等组成。由于磷酸盐和镁盐相混合时产生沉淀,因此,在混合培养基成分时,一般是按配方的顺序依次溶解各成分。对于象FeSO4·7H2O这样的微量成分,则可预先配成高浓度的贮备液,在配制培养基时按需要加入一定的量。
高氏1号培养基配方如下:
可溶性淀粉20g
NaCl0.5g
KNO31g
K2HPO4·3H2O0.5g
MgSO4·7H2O0.5g
FeSO4·7H2O0.01g
琼脂15—20g
水1000ml
pH7.4—7.6
三、器材
可溶性淀粉,KNO3,NaCl,K2HPO4·3H2O,MgSO4·7H2O,FeSO4·7H2O,琼脂,1mol/LNaOH,1mol/LHCl;
试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤
1.称量和溶化
按配方先称取可溶性淀粉,放入小烧杯中,并用少量冷水将淀粉调成糊状,再加入少于所需水量的沸水中,继续加热,使可溶性淀粉完全溶化。再称取其他各成分依次逐一溶化。对微量成分FeSO4·7H2O可先配成高浓度的贮备液后再加入,方法是先在100ml水中加入1g的FeSO4·7H2O配成0.01g/ml,再在1000ml培养基中加入1ml的0.01g/ml的贮备液即可。待所有药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下:
牛肉膏3g
蛋白胨10g
NaCl5g
琼脂15—20g
水1000ml
pH7.4—7.6
三、器材
牛肉膏,蛋白胨,NaCl,琼脂;
1mol/LNaOH,1mol/LHCl;
试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH5.5—9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤
1.称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化
在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。最后补足所失的水分。
3.调pH
在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。反之,则用1mol/LHCl进行调节。注意pH值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH值较精确的微生物,其pH的调节可用酸度计进行(使用方法,可参考有关说明书)。
4.过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利结果的观察。一般无特殊要求的情况下,这一步可以省去(本实验无需过滤)。
5.分装
按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图Ⅴ-1。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。
(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。
(2)固体分装分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面,如图Ⅴ-2。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
(3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。
6.加塞
培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)。
7.包扎
加塞后,将全部试管用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞后,外包牛皮纸,用麻绳以活结形式扎好,使用时容易解开,同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8.灭菌
将上述培养基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃,20分钟高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存。
9.搁置斜面
将灭菌的试管培养基冷至50℃左右,将试管棉塞端搁在玻棒上,搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
10.无菌检查
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。
附:棉塞的制作
棉塞的作用有二:一是防止杂菌污染;二是保证通气良好。因此,棉塞质量的优劣对实验的结果有很大的影响。正确的棉塞要求形状、大小、松紧与试管口(或三角烧瓶口)完全适合,过紧则防碍空气流通,操作不便;过松则达不到滤菌的目的。加塞时,应使棉塞长度的1/3在试管口外,2/3在试管口内,如图Ⅴ-3。棉塞的制作过程如图Ⅴ-4。
此外,在微生物实验和科研中,常要用通气塞。所谓通气塞,就是几层纱布(一般为8层)相互重叠而成,或是在两层纱布间均匀铺一层棉花而成。这种通气塞通常加在装有液体培养基的三角烧瓶口上。经接种后,放在摇床上进行振荡培养,以获得良好通气促使菌体的生长或发酵
http://bio.biox.cn/Biology/200701/20070106230740_25501.shtml
http://bio.biox.cn/Biology/200701/20070106230741_25502.shtml
大肠杆菌与牛肉膏蛋白胨培养基的菌落特征
1.光滑型:菌落边缘整齐,表面有光泽、湿润、光滑、呈灰色,在生理盐水中容易分散。
2.粗糙型:菌落扁平、干涩、边缘不整齐,易在生理盐水中自凝。
3.粘液型:常为含有荚膜的菌株。
牛肉膏蛋白胨培养基的性状和牛肉膏蛋白胨培养出来的土壤中的细菌菌落特征的问题分享结束啦,以上的文章解决了您的问题吗?欢迎您下次再来哦!
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