mrs培养基和牛肉膏培养基,肉汤培养基是什么
大家好,关于mrs培养基和牛肉膏培养基很多朋友都还不太明白,今天小编就来为大家分享关于MRS 肉汤培养基是什么的知识,希望对各位有所帮助!
MRS 肉汤培养基是什么
中文名 MRS肉汤
菌种 乳酸菌
英文名 MRSBroth
用途: 用于乳酸菌增菌培养
配方:(g/L)
蛋白胨10.0
肉膏10.0
酵母浸粉5.0
葡萄糖20.0
磷酸氢二钾2.0
柠檬酸氢二铵2.0
乙酸钠5.0
硫酸镁0.58
硫酸锰0.25
半胱氨酸0.5
吐温801.0
pH值6.2-6.4
原理:蛋白胨、肉膏、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,其成分还能抑制某些杂菌。
mrs培养基如何配制
MS培养基的配制包括以下步骤。培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。
MS培养基的配制步骤
植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。
编辑本段MS培养基的配制步骤
这样每次使用时,取其总量的1/20(50mL)或1/200(5mL),加水稀释,制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ)mg/LNH4NO333000KNO338000CaCl2·2H2O8800MgSO4·7H2O7400KH2PO43400
微量元素(母液Ⅱ)KI166H3BO31240MnSO4·4H2O4460ZnSO4·7H2O1720Na2MoO4·2H2O50CuSO4·5H2O5CoCl2·6H2O5
铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O5560Na2-EDTA·2H2O7460
有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇20000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6)100盐酸硫胺素(维生素B1)100甘氨酸400
以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1L的贮备液。
其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1L。
母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5?5,最后定容到1L,保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。
MS培养基中还需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0?1mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10mg,将2,4-D和NAA用少量(1mL)无水乙醇预溶,将6-BA用少量(1mL)的物质的量浓度为0.1mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100mL,即得质量浓度为0?1mg/mL的母液。
配制培养液用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量:母液Ⅰ为50mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5mL。再取2,4?D5mL、NAA1mL,与各种母液一起放入烧杯中。
编辑本段MS培养基配制培养液时的注意事项
配制培养液时应注意:①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制;②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次;③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错。溶化琼脂用粗天平分别称取琼脂9g、蔗糖30g,放入1000mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1000mL,搅拌均匀。需要注意的是,在加热琼脂、制备培养基的过程中,操作者千万不能离开,否则沸腾的琼脂外溢,就需要重新称量、制备。此外,如果没有搪瓷量杯,可用大烧杯代替。但要注意大烧杯底的外表面不能沾水,否则加热时烧杯容易炸裂,使溶液外溢,造成烫伤。调pH用滴管吸取物质的量浓度为1mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用精密的pH试纸(5.4~7.0)测培养基的pH,一直到培养基的pH为5.8为止(培养基的pH必须严格控制在5.8)。培养基的分装溶化的培养基应该趁热分装。分装时,先将培养基倒入烧杯中,然后将烧杯中的培养基倒入锥形瓶(50mL或100mL)中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5~1/4。每1000mL培养基,可分装25~30瓶。培养基分装完毕后,应及时封盖瓶口。用2块硫酸纸(每块大小约为9cm×9cm)中间夹1层薄牛皮纸封盖瓶口,并用线绳捆扎。最后在锥形瓶外壁贴上标签。
关于MRS培养基
乳酸细菌培养基(MRS)
蛋白胨10.0g
牛肉膏10.0g
酵母膏5.0g
柠檬酸氢二铵[(NH4)2HC6H5O7]2.0g
葡萄糖(C6H12O6·H2O)20.0g
吐温801.0mL
乙酸钠(CH3COONa·3H2O)5.0g
磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O)2.0g
硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.58g
硫酸锰(MnSO4·H2O)0.25g
琼脂18.0g
蒸馏水1000mL
pH6.2~6.6
当乳酸菌生长代谢出乳酸后,会使pH下降而使颜色由绿变为黄绿,也由于pH值降低再加上抗生素及厌氧培养的作用,所以一般的微生物不容易在此培养基上生长,因此十分容易鉴别乳酸菌。
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